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實(shí)驗(yàn)室液相色譜儀的計(jì)量校準(zhǔn)

更新時(shí)間:2025-07-09

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  實(shí)驗(yàn)室液相色譜儀的計(jì)量校準(zhǔn)是一個(gè)涉及多個(gè)方面的過(guò)程,以下是詳細(xì)的步驟和注意事項(xiàng):
  一、環(huán)境條件
  在進(jìn)行液相色譜儀的計(jì)量校準(zhǔn)前,應(yīng)確保環(huán)境條件符合以下要求:
  室溫應(yīng)保持在(15~30)℃,校準(zhǔn)過(guò)程中溫度變化不超過(guò)3℃(對(duì)于差示折射率檢測(cè)器,室溫變化不超過(guò)2℃)。
  室內(nèi)相對(duì)濕度應(yīng)保持在(20~85)%。
  房間內(nèi)不得存放易燃、易爆、強(qiáng)腐蝕性物品。
  無(wú)明顯的機(jī)械振動(dòng)和電磁干擾,且通風(fēng)良好。
  二、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和校準(zhǔn)設(shè)備
  應(yīng)使用國(guó)家有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),并確保校準(zhǔn)設(shè)備經(jīng)過(guò)計(jì)量檢定合格。常用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包括:
  萘-甲醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),定值為1.00×10^-4g/mL,擴(kuò)展不確定度小于4%。
  膽固醇甲醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),標(biāo)準(zhǔn)值為200μg/mL,擴(kuò)展不確定度小于2.0%。
  其他根據(jù)具體校準(zhǔn)需求選擇的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
  校準(zhǔn)設(shè)備可能包括移液器、容量瓶、溫度計(jì)等。
 

 

  三、校準(zhǔn)步驟
  1.輸液系統(tǒng)校準(zhǔn)
  泵的耐壓性:連接好儀器各部分,以甲醇(或純水)為流動(dòng)相,流速設(shè)為0.2mL/min。啟動(dòng)儀器并保持壓力穩(wěn)定10分鐘,檢查各管道接口處是否有泄漏。取下色譜柱,堵塞泵出口端,使壓力達(dá)到最大允許值的90%,保持5分鐘,確認(rèn)無(wú)泄漏。
  泵流量設(shè)定誤差及流量穩(wěn)定性:按要求設(shè)定流速,啟動(dòng)儀器并待壓力穩(wěn)定后,用清潔容量瓶在流動(dòng)相出口處收集流動(dòng)相,計(jì)時(shí)并稱重,計(jì)算所測(cè)流速。重復(fù)校準(zhǔn)3次以確保準(zhǔn)確性。
  梯度誤差:設(shè)置梯度洗脫程序,用溶劑A(如水)和溶劑B(如含0.1%丙酮的水溶液)進(jìn)行梯度變化曲線的繪制和計(jì)算。
  2.柱箱溫度設(shè)定點(diǎn)誤差和穩(wěn)定性校正
  將數(shù)字溫度計(jì)探頭置于色譜柱恒溫器中與色譜柱相同的位置。
  選擇設(shè)定溫度(如35℃和45℃),待溫度穩(wěn)定后記錄讀數(shù),并每10分鐘記錄一次,共7次。
  計(jì)算平均值與設(shè)定值間的差值作為柱溫設(shè)定值的誤差,7個(gè)讀數(shù)中的極大值與最小值之差作為柱溫穩(wěn)定性。
  3.探測(cè)器標(biāo)定
  以紫外可見光探測(cè)器和二極管陣列探測(cè)器為例,連接好儀器各部分,選用合適的色譜柱和流動(dòng)相。
  設(shè)置相應(yīng)的測(cè)量參數(shù),如波長(zhǎng)、靈敏度等。
  基線穩(wěn)定后注入一定體積的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液(如1.0×10^-4g/mL的萘-甲醇溶液),連續(xù)測(cè)定并記錄色譜峰的保留時(shí)間和峰面積。
  4.進(jìn)樣體積準(zhǔn)確性校準(zhǔn)(如適用)
  可采用標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)法、稱重法、定量環(huán)校準(zhǔn)法或與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣器對(duì)比法等方法進(jìn)行。
  標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)法:使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液多次進(jìn)樣,記錄色譜峰響應(yīng)值并計(jì)算進(jìn)樣體積的準(zhǔn)確性。
  稱重法:通過(guò)稱重計(jì)算實(shí)際吸取的溶劑體積并與設(shè)定體積進(jìn)行對(duì)比。
  定量環(huán)校準(zhǔn)法:檢查定量環(huán)的體積準(zhǔn)確性,通過(guò)觀察色譜峰形狀和響應(yīng)值來(lái)判斷。
  與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣器對(duì)比法:使用標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣器進(jìn)行對(duì)比分析,計(jì)算進(jìn)樣體積的偏差并進(jìn)行調(diào)整。
  四、校準(zhǔn)記錄和報(bào)告
  在校準(zhǔn)過(guò)程中應(yīng)詳細(xì)記錄各項(xiàng)數(shù)據(jù)和觀察結(jié)果。
  校準(zhǔn)完成后應(yīng)編寫校準(zhǔn)報(bào)告,包括校準(zhǔn)日期、環(huán)境條件、校準(zhǔn)設(shè)備、校準(zhǔn)步驟、數(shù)據(jù)記錄和分析結(jié)果等內(nèi)容。
  校準(zhǔn)報(bào)告應(yīng)由專業(yè)人員審核并簽字確認(rèn)。
  五、注意事項(xiàng)
  校準(zhǔn)過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程和安全規(guī)范。
  使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)應(yīng)確保其有效期內(nèi)并妥善保存。
  校準(zhǔn)設(shè)備應(yīng)定期維護(hù)和檢定以確保其準(zhǔn)確性。
  實(shí)驗(yàn)室液相色譜儀的計(jì)量校準(zhǔn)是一個(gè)復(fù)雜而精細(xì)的過(guò)程,需要專業(yè)人員嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行以確保儀器的準(zhǔn)確性和可靠性。

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